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教你血球计数板棋牌计数的方法
点击次数:106 发布时间:2020-07-08

1.制备棋牌悬液:对于悬液培养的棋牌,可直接进行下面的步骤2(计数与计算过程)。如果计数对象为贴壁生长的棋牌,首先需将培养物按如下步骤制备成棋牌悬液。

①终止培养,将培养液吸出,用PBS洗培养物一次。

②给培养瓶内加入1ml 0.25%胰蛋白酶溶液,于37℃消化3~5min 。期间不断在镜下观察。当棋牌变圆接近脱壁时,弃消化液。

③加入一定量的培养液(如果这些培养棋牌不再有用,可加PBS),用吸管吹打,使棋牌脱壁而制成棋牌悬液。

2.计数与计算过程

①在棋牌计数板中央放置计数专用的盖玻片。

②用玻璃虹吸管吸取棋牌,让虹吸管在盖玻片上或下侧的计数板凹蹧处流出悬液,至盖玻片被液体充满为止。

③置显微镜下计数四角大方格内的棋牌总数。对于压线的棋牌只计数在上线和左线者,对于棋牌团按单个棋牌计数。

④按下式计数棋牌悬液的密度:棋牌密度=(4个大格棋牌总数/4)×104个/ml 。

二、注意事项:

①务必使分散成单个棋牌,取样计数前,充分混匀棋牌悬液。

②显微镜下计数时,遇到2个以上棋牌组成的棋牌团,应按单个棋牌计算。如果棋牌团>10%,说明棋牌分散不充分。

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